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水蜜桃下载流動相試劑的選擇
2022-05-21 13:52
  水蜜桃下载是利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學作用性能的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反複多次受到上述各作用力而達到相互分離。水蜜桃下载在食品分析、環境分析、生命科學、醫學檢驗和無機分析等領域得到廣泛使用。一般來說,80%~85% 的有機物原則上可采用水蜜桃下载分析。
  水蜜桃下载是以高壓下的液體為流動相,並采用顆粒極細的固定相的柱色譜分離技術。現如今,液相色譜法應用非常廣泛,像是高沸點不易揮發的、受熱不穩定的有機化合物都可以用水蜜桃下载來測定,比氣相色譜的局限性小很多。流動相就像是一條延綿不斷的河流,從儲液瓶出發,經過脫氣機,混合比例閥再到色譜柱,檢測器,最後流到了廢液桶。如果它不純淨或被汙染的話,那整個液相都會波及到。下麵小編就帶大家一塊來學習一下使用流動相時的注意事項吧。
  一、流動相試劑的選擇
  1.色譜純。水蜜桃下载所用的試劑必須是色譜純級別的,而且使用之前需要抽濾經過0.45um或者0.22um的微孔濾膜,除去試劑中的細小顆粒和其他雜質,以免溶劑殘留的雜質在色譜柱長期累積,降低柱效和壽命。
  2.粘度。一般要求流動相的粘度應小於2cp,若使用高粘度溶劑,勢必會增高柱壓,不利於分離。常用的低粘度溶劑有乙腈、丙酮、乙醇等。
  3.溶解性。溶劑對於待測樣品,必須具有合適的極性和良好的選擇性,符合相似相溶的原則,以免樣品沉澱在係統中特別是色譜柱中,日積月累降低柱效。
  4.溶劑要與檢測器匹配。對於紫外吸收檢測器,應注意選用的檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。截止波長是指某一個特定的波長,超過這個波長的紫外線,紫外檢測器對其幾乎不響應,或者說響應很小。對於示差檢測器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相,來達到最好的靈敏度。
  5.緩衝鹽和PH。用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時,通過調節流動相的pH值,來抑製樣品目標物的解離,增加目標物在固定相上的保留,並改善峰形的技術稱為反相離子抑製技術。一般樣品溶液是酸性時,會在流動相中加入少量甲酸,醋酸或者磷酸來提高液相的分離度和改善峰形,但一定注意流動相的PH在色譜柱的耐受酸堿度範圍內。樣品溶液是堿性時則相反。可以根據目標物的pKa來確定pH,根據pH選擇緩衝鹽的種類,常用的緩衝鹽溶液有乙酸銨,磷酸鹽,三乙胺等。
  二、流動相的儲存
  1.流動相一般貯存於玻璃、聚四氟乙烯或不鏽鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。和waters液相配套的一般都是玻璃瓶。
  2.流動相的存放時間一般不超過24h,現配現用是最安全的,特別是緩衝鹽溶液,如乙酸鹽等,極容易產生沉澱和滋生微生物長黴。長期積累的微生物會出現肉眼可見的絮狀“毛毛”粘附在溶劑濾頭上,損壞濾頭,然後進入真空腔和比例閥甚至是色譜柱中,最終損壞一連串的儀器配件和耗材。因此緩衝鹽的流動相最好是現配現用,抽濾脫氣(一般是超聲波脫氣),不要貯存,使用完後仔細刷洗儲液瓶,然後準備下一次的使用。
  3.儲液瓶一定要蓋嚴,最好用原裝配套的蓋子,一是防止溶劑,特別是有機溶劑的揮發引起組分變化,導致保留時間的改變,二是防止二氧化碳溶入流動相中,影響流動相的PH值。
  總結:流動相的選擇和使用看似簡單,往往被大家所忽略,但也是出問題最多的地方,許多色譜柱,泵,檢測器汙染的問題都是因為流動相引入的雜質產生的,希望大家能重視。像抽濾和脫氣,緩衝鹽的現配現用等等這些看似不起眼的小細節,卻是儀器維護保養的最有效手段。一分耕耘,一分收獲,日常的按部就班,一點一滴的維護,才能保證儀器的長久耐用!
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